Полиморфизм гена метилентетрагидрофолатредуктазы у больных артериальной гипертонией в Республике Мордовия

Артериальная гипертония (АГ) является главным фактором риска сердечно-сосудистых осложнений и наносит огромный ущерб здоровью населения. Доказано, что основной причиной тробофилического состояния при АГ является активация сосудисто-тромбоцитарного звена гемостаза, прогрессирующая по мере развития заболевания [Василенко А.И., 1992; Задионченко В.С., 202; Arican E., 2005; Coban E., 2004; Kario K., 2000]. В большинстве случаев эти нарушения носят генетический характер. В качестве наиболее значимых факторов такого рода обсуждаются мутации гена метилентетрагидрофолатредуктазы (MTHFR) в позициях А1298С и С677Т [Козловская Н.Л., 2003; Иллариошкин С,Н., 2005; De Stefano V. et al, 1996; Nagaraja D., Christopher R., 2002; Slooter A.J. et al, 2005; Lalouschek W. et al, 2005; Markus H.S., Alberts M.J., 2006]. C677T-полиморфизм MTHFR влияет на распределение соединений фолиевой кислоты, используемых для синтеза ДНК и РНК, и 5-метилтетрагидрофолата, необходимого для реметилирования гомоцистеина, а, значит, – для синтеза белка. Неспособность регенирировать метионин приводит к истощению запаса метионина и выбросу в кровь избытка гомоцистеина.

Другим вариантом полиморфизма гена MTHFR является миссенс-мутация аденина (А) на цитозин (С) в позиции 1298 (А1298С). Гетерозиготность или гомозиготность по данной мутации не сопровождается ни повышением концентрации общего ГЦ, ни снижением уровня фолата в плазме [Dekou V. et al, 2001; Bailey L.B. et al, 2002; Domagala T.B. et al, 2002; Rolling K. et al, 2004; Ho G.Y, et al, 2006]. Однако комбинация гетерозиготности аллелей 677Т и 1298С сопровождается снижением активности фермента, повышением концентрации ГЦ в плазме и снижением уровня фолата, как при гомозиготности 677Т [Hanson N.Q. et al, 2001; Weisberg I., 1998].

В связи с этим представляет особый интерес изучение генетических аспектов гена метилентетрагидрофолатредуктазы при артериальной гипертонии у больных Республики Мордовия. Исходя из этого, целью настоящего исследования явилось изучение полиморфизм гена метилентетрагидрофолатредуктазы у лиц мордовской (мордва-мокша и мордва-эрзя) и русской национальностей с эссенциальной АГ, проживающих на территории Республики Мордовия.

Материалы и методы. Было обследовано 141 пациент с АГ (II-III стацией по классификации ВНОК 2008 г.) и 90 добровольцев с нормальным уровнем АД (< 140/90 мм. рт.ст) и не имеющих родственников первой линии, страдающих артериальной гипертонией. Для достижения поставленной цели были сформированы три группы пациентов, в зависимости от национальной принадлежности. Первая группа представлена пациентами с эссенциальной АГ этнические русские - 42 человека (35% мужчин и 65% женщин), вторая - пациенты с эссенциальной АГ мордва-эрзя – 53 человека (30% мужчин и 70% женщин), третья группа - пациенты с эссенциальной АГ мордва-мокша – 46 человек (30% мужчин и 70% женщин). В каждой группе дополнительно было обследовано 30 волонтеров с нормальным уровнем АД и без клинических признаков других заболеваний соответствующих национальностей. Группы были репрезентативны по возрастно-половому критерию: средний возраст больных АГ мордва- эрзя составляет 47,9±1,6 лет, больных АГ мордва-мокша 52,6±1,3 лет, больных АГ русской национальности 52,8±1,9 лет.

 Диагностика АГ, её стадии, расчет риска развития осложнений проводилось на основании данных анамнеза, лабораторных и инструментальных исследований согласно принятой классификации АГ. Наряду с традиционными клинико-инструментальными исследованиями, проводилась идентификация аллелей полиморфных маркеров методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Молекулярно-генетические исследования проводились в лаборатории молекулярной генетики РКНПК г. Москва. У всех пациентов на проводимые исследования было получено информированное согласие.

Статистический анализ результатов проведен с помощью пакетов программ «Statistica for Windows 6.0» (StatSoft), SPSS (версия 14.0), программного обеспечения MS Excel XP (Microsoft). При сравнении частот генотипов и аллелей в группах больных лиц использовался χ².

Результаты и обсуждение. Анализ распределения генотипов гена MTHFR в позиции 677 у пациентов с АГ (СС-42,1% (р=0,001), СТ-52,6% (p=0,001), ТТ-5,3%) и обследованных лиц с нормальным уровнем АД (СС – 31,0 % (p=0,0003), СТ – 63,8% (p=0,004), ТТ – 5,2%) выявил, что «неблагоприятный» генотип ТТ встречается достоверно реже, что также отражено и при рассмотрении данных генотипов гена MTHFR в позиции 677 в зависимости от национальной принадлежности пациентов.

При сравнительном анализе частот встречаемости генотипов обследуемого гена у больных АГ в зависимости от национальной принадлежности выявлено, что среди русских пациентов чаще встречается генотип СС (р=0,016), но реже генотип СТ (р=0,014) по сравнению с больными АГ мордва-мокша. В остальном распределение генотипов гена MTHFR статистически не различалось.

В то же время в группе контроля у русских обследованных с нормальным уровнем АД достоверно чаще встречается гомозиготный по аллелю С генотип по сравнению с мордва-эрзя (р=0,05) и мордва-мокша (р=0,015), а в группе здоровых мокша генотип СТ (р по сравнению с русскими = 0,015, по сравнению со здоровыми мокша р=0,007).

При сравнении распределения генотипов в основной и контрольной группах выявлено, что среди больных АГ мордва-мокша достоверно чаще встречается генотип СТ (р=0,037) по сравнению со здоровыми мокша. В остальном частота встречаемости генотипов гена MTHFR статистически не различалась.

При анализе встречаемости генотипов гена MTHFR A1298C у больных АГ и здоровых лиц выявлено достоверное преобладание в обеих группах гетерозиготного генотипа АС. Статистически значимое различие в распределении генотипов основной и контрольной групп выявлено для генотипа СС, больше носителей данного генотипа в группе больных АГ (13,0%, р=0,04) по сравнению с нормальным АД - СС-3,4%. При проведении анализа распределения генотипов гена MTHFR 1298 у больных с АГ в зависимости от национальной принадлежности выявлено, что среди пациентов АГ русской национальности статистически значимого преобладания какого-либо генотипа отметить нельзя. В группах мордовской национальности (мокша и эрзя) достоверно чаще встречается гетерозиготный генотип АС. В группе контроля среди русских и мордва-мокша чаще выявлен генотип АС (95%, р2/1/3<0,001) изучаемого гена, тогда как в группе эрзян достоверно реже выявлен генотип СС (9,5%).

При сравнительном анализе распределения генотипов гена MTHFR 1298 у больных АГ выявлено преобладание генотипа АА в группе русских пациентов по сравнению с больными мордва-мокша (р=0,001) и мордва-эрзя (р=0,001), в тоже время в группе эрзя, страдающих АГ, чаще встречается генотип АС по сравнению с русскими пациентами (р=0,004), а в группе мокша с АГ генотип СС по сравнению с группой русских (р=0,015) и эрзя больных c АГ (р=0,05). В группе контроля у обследованных лиц мордва-эрзя достоверно чаще встречается «благоприятный» гомозиготный по аллелю А генотип по сравнению с группой мордва-мокша (р=0,001), но реже выявлен генотип АС (р=0,001).

При сравнении распределения генотипов в основной и контрольной группах гена MTHFR в позиции 1298 выявлено, что среди русских больных АГ достоверно чаще встречается генотип АА (р=0,03), а среди лиц с нормальным уровнем АД генотип АС гена MTHFR (р=0,01), среди мокша с повышенными цифрами АД чаще встречается «неблагоприятные» генотипы АС (р=0,002) и СС (р=0,02), чем в группе мокша с нормальными цифрами АД, в группе больных с АГ эрзянской национальности преобладает генотип АС (р=0,015), а в группе здоровых лиц эрзянской национальности преобладают носители генотипа АА (р=0,01). Кроме того, у лиц мордовской национальности выявлен больший процент комбинаций неблагоприятных генотипов гена MTHFR в позиции 1298 и 677 (мордва-мокша - 43,4%, р=0,0008, мордва-эрзя - 43,5%, р=0,001) по сравнению с русскими.

Таким образом, выявлено преобладание носительства генотипа СТ гена MTHFR в позиции С667Т у больных артериальной гипертонией мордва-мокша и мордва- эрзя. Также выявлено достоверное преобладание «угрожающих» комбинаций генов (MTHFR C677T и MTHFR A1298C) у лиц мордовской национальности, как эрзя, так и мокша по сравнению с больными артериальной гипертонией русской национальности.