Анализ породного состава пчел окрестностей г. Добруш морфометрическими и молекулярно-генетическими методами

Интенсивная межпородная гибридизация пчел вследствие завоза маток других подвидов приводит к снижению устойчивости Apies melifera L. к болезням и вредителям, а также ухудшению их зимостойкости [3].

Чистопородность пчел определяют разными методами, в том числе основанными на анализе экстерьерных признаков отдельных особей. Однако самым эффективным способом является анализ с использованием молекулярно-генетических маркеров. Один из таких маркеров – спейсерный участок COI-COII мтДНК пчел [2, 4].

Целью исследований был анализ породного состава особей A. mellifera с использованием морфометрических и молекулярно-генетических методов.

Методика исследований. Сбор особей пчел проводился на пасеке и суходольном лугу окрестностей г. Добруша. Пасека включала 6 ульев, из каждого улья были отобраны по 5 особей Apis mellifera. На суходольном лугу было проанализировано 30 особей Apis mellifera. У особей анализировались: окраска тела; длина хоботка, мм; длина крыла, мм; ширина крыла, мм; кубитальный индекс на правом крыле. Для молекулярно-генетического анализа спейсерного участка COI-COII мтДНК проводили выделение ДНК из грудных мышц пчел упрощенным CTAB-методом. Выделенная ДНК анализировалась методом ПЦР с использованием праймеров, маркирующих межгенный локус COI-COII митохондриального генома [1, 3].

Результаты исследований. В таблице 1 представлены средние значения морфометрических параметров пчел, собранных на пасеке и на лугу.

Таблица 1

Средние значения морфометрических показателей пчёл

Как видно из таблицы 1, для 25 проанализированных особей с пасеки морфометрические параметры укладывались в стандарты краинской породы: серебристо-серая окраска тела, длина хоботка – 6,48±0,044 мм, кубитальный индекс – 45,16±3,4 мм, длина крыла – 9,26±0,018 мм, ширина крыла – 3,18±0,013 мм. У 5 особей была выявлена серая окраска. Пчелы, отловленные на лугу относились к краинской, карпатской и среднерусской породам.

В результате молекулярно-генетического анализа у пчел, собранных на пасеке, был выявлен 1 аллель локуса СОI-СОII мтДНК: аллель Q, характерный для южных пород, в том числе и краинской, а на суходольном лугу – два аллеля: аллель PQQ, характерный для среднерусской породы, был обнаружен у 4 особей (13,33%); аллель Q – в 25 образцах (86,67%). На рисунках 1 и 2 представлены соответствующие фореграммы.

Рис. 1. Электрофорез продуктов ПЦР локуса COI-COII мтДНК собранных на пасеке пчел: М-маркер молекулярных масс, 1-9 – элемент Q (фрагмент размером 350 п.н.)

Рис. 2. Электрофорез продуктов ПЦР локуса COI-COII мтДНК у пчел, собранных на лугу: М-маркер молекулярных масс, 1,2,4,5,7 – элемент Q (фрагмент размером 350 п.н.); 3,6,8,9 – элемент PQQ (фрагмент размером 600 п.н.)

В таблице 2 приведено сопоставление результатов морфометрического и молекулярно-генетического анализа для исследованных биотопов. Как видно из таблицы, на пасеке и у особей, для которых были выявлены характерные для краинской породы морфометрические признаки, и у особей, для которых не все определенные показатели укладывались в стандарты данной породы (гибриды), был выявлен только аллель Q. Среди пчел, отловленных на лугу, по морфометрическим признакам 9 особей относится к среднерусской породе, а по генетическому маркеру 5 особей идентифицированы, как представители южных пород. Лишь для 4 экземпляров обнаружено полное соответствие среднерусской породе по обоим показателям.

Таблица 2

Сопоставление результатов морфометрического и молекулярно-генетического анализа пчел, отобранных на пасеке и лугу

 У 21 особи, отнесенных по морфометрическим признакам к карпатской и краинской породам был выявлен аллель Q.

Таким образом, на основе комплекса цветовых и морфометрических параметров установлено, что на исследованных участках преобладают краинская, карпатская и среднерусская породы. Сопоставление результатов обоих анализов указывает на процесс метисации среднерусской и южных пород в популяциях медоносной пчелы на исследованном участке.