Введение. Растения играли важную роль в поддержании здоровья человека с древних времен. Традиционные растения играют важную роль в поиске новых лекарств. Большинство людей во всем мире страдают расстройствами, связанными с воспалением. Современные синтетические обезболивающие препараты считаются вредными во всех случаях из-за их побочных эффектов, таких как раздражение желудочно-кишечного тракта, нарушение функции печени [1].
Манжетка обыкновенная (Alchemilla vulgaris L.) имеет широкое применение в народной медицине для лечения различных заболеваний, таких как воспаления полости рта, кровотечения из носа, фурункулы, гинекологические проблемы (меноррагия и дисменорея), а также желудочно-кишечные расстройства. Несмотря на то что основными показаниями для применения манжетки обыкновенной (Alchemilla vulgaris L.) являются неспецифическая диарея и желудочно-кишечные расстройства, существует информация о её разнообразных биологических свойствах, включая способность заживлять раны, антимикробные, нейропротекторные, гастропротекторные, цитотоксические и антиоксидантные свойства. Мантия представляет собой ценный источник естественных биоактивных соединений, главным образом фенольных, таких как дубильные вещества, фенолкарбоновые кислоты и флавоноиды, ответственные за описанные выше эффекты [2].
В качестве современного метода экстракции для данного вида растения рассмотрен метод ультразвуковой экстракции. Применение ультразвуковой экстракции существенно сокращает время процесса и обеспечивает более эффективное извлечение компонентов. Воздействие ультразвуковых волн нарушает граничный диффузионный слой, что способствует улучшению проникновения экстрагента в материал. Этот процесс приводит к быстрому набуханию сырья, образованию турбулентных и вихревых потоков, что способствует более эффективному переносу веществ и их растворению. В результате происходит значительное ускорение процесса перехода активных компонентов из сырья в экстрагент [3].
Цель исследования. Установление химического состава Alchemilla vulgaris L.
Материалы и методы исследования. Материалом исследования является лекарственное растительное сырье манжетка обыкновенная (Alchemilla vulgaris L.).
Определение органических соединений в экстрактах растения проводились методом анализа газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (7890A/5975C).
Условия анализа: объем образца 0,5 мкл, температура ввода пробы 250 °С, без деления потока. Разделение проводили с помощью хроматографической капиллярной колонки DB-WaxEtr длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм и толщиной пленки 0,25 мкм при постоянной скорости газа-носителя (гелий) 1 мл/мин. Температуру хроматографирования программируют от 40 °С (выдержка 0 мин) со скоростью нагрева 5 °С/мин до 280 °С, (выдержка 15 мин). Время анализа 63 минут. Детектирование проводилось в режиме SCAN m/z 34-750. Для управления системой газовой хроматографии, регистрации и обработки полученных результатов и данных использовали программное обеспечение Agilent MSD ChemStation (версия 1701ЕА). Обработка данных включала в себя определение времен удерживания, площадей пиков, а также обработку спектральной информации, полученной с помощью масс-спектрометрического детектора. Для расшифровки полученных масс-спектров использовали библиотеки Wiley 7th edition и NIST’08 (общее количество спектров в библиотеках – более 550 тыс.).
Результаты исследования. Экспериментально было установлено для получения экстракта 50 г измельченного сырья помещают в колбу, прибавляют 500 мл 70% спирта и ставят в ультразвуковую установку в течение 1 часа (3 раза). Ультразвуковую экстракцию проводили с помощью ультразвуковой установки KQ5200B при напряжении 40KHz.
Полученный раствор фильтруют через бумажный фильтр и сушат на роторном испарителе марки EYELA N-1300 при температуре 45˚С.
Качественный и количественный состав этих экстрактов проанализирован методом газовой хроматографии (таблица).
Таблица
Результаты хроматографического анализа экстракта
№ | Время удерживания, мин | Соединения | Молекулярная масса, г/моль | Молекулярная формула | Pubchem compound | Вероятность идентификации, % | Процентное содержание, % |
1 | 7,59 | 2,4,6-триметилдекан | 184.36 | C13H28 | 537327 | 87,7 | 1,88 |
2 | 13,17 | Тетрадекан | 198.39 | C14H30 | 12389 | 85,4 | 0,87 |
3 | 14,82 | Нонадекан | 268.5 | C19H40 | 12401 | 86,5 | 0,82 |
4 | 17,52 | 4-метилтетрадекан | 212.41 | C15H32 | 520179 | 86,4 | 0,23 |
5 | 18,13 | Пентадекан | 212.41 | C15H32 | 12391 | 88 | 0,52 |
6 | 18,84 | 2,6,10,15-тетраметилгептаде-кан | 296.6 | C21H44 | 41209 | 85,8 | 2,47 |
7 | 19,77 | Октадекан | 254.5 | C18H38 | 11635 | 85,8 | 0,49 |
8 | 23,70 | 2,6,11,15-тетраметилгексадекан | 282.5 | C20H42 | 136331 | 86,6 | 2,31 |
9 | 24,13 | 2,4-бис(1,1-диметилэтил)фенол | 206.32 | C14H22O | 7311 | 91,9 | 2,37 |
10 | 24,81 | Гептакозан | 380.7 | C27H56 | 11636 | 83,3 | 1,05 |
11 | 28,05 | Фитол | 296.5 | C20H40O | 5280435 | 83,3 | 3,60 |
12 | 28,36 | n-Додецил метакрилаты | 254.41 | C16H30O2 | 8906 | 86,5 | 1,35 |
13 | 29,55 | 6,10,14-триметил-2-пентадеканон | 268.5 | C18H36O | 10408 | 86,9 | 0,75 |
14 | 30,38 | Тридециловый эфир метакрилой кислоты | 268.4 | C17H32O2 | 17234 | 87,3 | 0,84 |
15 | 32,31 | Гексадециловый эфир метакриловой кислоты | 310.5 | C20H38O2 | 17235 | 85,8 | 1,35 |
16 | 34,16 | Пентадециловый эфир метакриловой кислоты | 296.5 | C19H36O2 | 80232 | 85,8 | 0,54 |
17 | 36,12 | Трикозан | 324.6 | C23H48 | 12534 | 85 | 0,87 |
18 | 39,39 | Гексакозан | 366.7 | C26H54 | 12407 | 85,8 | 1,37 |
19 | 45,25 | Октакозан | 394.8 | C28H58 | 12408 | 88,8 | 2,55 |
20 | 46,97 | 1-Докозен | 308.6 | C22H44 | 74138 | 87,7 | 0,63 |
21 | 47,90 | Тетратриаконтан | 478.9 | C34H70 | 26519 | 91,4 | 12,01 |
22 | 48,81 | Октадеканал | 268.5 | C18H36O | 12533 | 87,5 | 2,39 |
23 | 50,40 | Тритриаконтан | 464.9 | C33H68 | 12411 | 92,6 | 44,62 |
В результате ГХ-МС исследования экстракта манжетки обыкновенной (Alchemilla vulgaris L.), выделенного методом ультразвуковой экстракции, была получена хроматограмма (рисунок).
Рис. Хроматограмма экстракта
Как следует из таблицы 1 и рисунка, в извлечении доминируют алканы, тритриаконтан (44,62%), тетратриаконтан (12,01%).
н-Алканы – это прямоцепочечные углеводороды. Они стабильны, потому что в них отсутствуют функциональные группы. За счет таких свойств легко доступны для существующих и вымерших растений. В данном исследовании наблюдалась некоторая закономерность в том, что углеводороды с длинной цепью имеют большую концентрацию [4].
Исследования показали, что фитол обладает свойствами антиоксиданта и антиноцицептика. Это вещество, которое является предшественником синтетических витаминов Е и К, оказалось цитотоксичным для клеточных линий рака молочной железы [5]. Тетрадекан и пентадекан оказывают антибактериальный эффект [6].
Гептакозан является антикоррозийным/антиоксидантным средством. Тетратриконтан и другие высшие алкены обладают противогрибковым действием, в частности, против спор грибов, прорастания, а также являются антиоксидантами и противоопухолевыми средствами [7].
Фенольные соединения, эфиры, алканы, альдегиды, алкены и кетоны являются основными летучими соединениями, которые обладают противовоспалительной, противоартритной, антидиабетической, противоязвенной, гиполипидемической, антиатеросклеротической, анти-ВИЧ и цитотоксической активностью. Фенол, 2, 4-бис (1, 1-диметилэтил) - производное, присутствует в различных растениях и известен своей антибактериальной и противовоспалительной активностью [8].
Заключение. Наше исследование показало, что этанольные экстракты воздушных частей и корней A. vulgaris содержат высокое содержание алканов. Установлено, что основными компонентами экстракта являются тритриаконтан (44,62%), тетратриаконтан (12,01%).